Nghiên cứu tối ưu quy trình phát hiện Neisseria meningitidis bằng kỹ thuật LAMP kết hợp CRISPR-Cas

Abstract

Tối ưu quy trình phát hiện Neisseria meningitidis bằng kỹ thuật LAMP kết hợp CRISPR-Cas, có thể đọc kết quả bằng que thử nhanh. Toàn bộ quy trình được thực hiện trong khoảng 70 phút. Quy trình tối ưu được có ngưỡng phát hiện là 75 bản sao/phản ứng (độ tin cậy 95%) và độ đặc hiệu kỹ thuật là 100% trên panel DNA người, N. gornohoae, E. coli, K. pneumoniae. Độ nhạy, độ đặc hiệu của phương pháp phát hiện trên 139 mẫu bệnh phẩm thực tế so với kỹ thuật phát hiện tiêu chuẩn Realtime PCR lần lượt là 90.91% và 98.81%. Nghiên cứu chỉ ra phương pháp LAMP kết hợp với CRISPR-Cas phát hiện N. meningitidis là một phương pháp mạnh mẽ và đáng tin cậy có tiềm năng ứng dụng trong sàng lọc thực tế. Quy trình đơn giản của LAMP-CRISPR-Cas phù hợp để sử dụng trong các phòng thí nghiệm lâm sàng, những nơi có nguồn lực hạn chế, đặc biệt phù hợp với đặc điểm hành quân và di chuyển của các đơn vị quân sự.