Tạo bào tử probiotic biểu hiện streptavidin gắn kết kháng thể biotinyl hóa, bước đầu ứng dụng trong chuẩn đoán : Đề tài NCKH. QG. 10-05

Abstract

Sử dụng công nghệ gen để nhân dòng và biểu hiện streptavidin bề mặt bào tử Bacillus subtilis và sử dụng bảo tử này như một chất mang đa dụng nhờ vào áp lực cao giữa streptavidin với biotin và các phân tử được biotiny hóa. Kết quả đạt được: Đã nhân dòng thành công gen cotB-streptavidin và cotB-GSt- streptavidin vào vector pDG364 và dung hợp thành công đoạn gen cotB- streptavidin, cotB-GSt- streptavidin vào AND hệ gen Bacillus subtilis. Đã biểu hiện thành công protein dung hợp cotB- streptavidin, cotB-GSt- streptavidin trên bề mặt bào tử Bacillus subtilis. Bào tử -strep đã gắn kết đặc hiệu và bền vững với kháng thể đơn dòng và đa dòng kháng VP28 được biotinyl hóa. Đã ứng dụng được bào tử-strep gắn kháng thể kháng VP28-biotinyl để phát hiện sự có mặt của virus gây bệnh đốm trắng mờ phả ứng ngưng kết. Đã xây dựng được 3 quy trình: Nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa cho cotB- streptavidin trên bề mặt bào tử Bacillus subtilis; Gắn kết kháng thể biotinyl hóa lên bề mặt bào tử streptavidin; Phát hiện kháng nguyên đặc hiệu của WSSV bằng bào tử - strep-biotinyl anti VP28IgG thông qua phản ứng ngưng kết.